病原真菌的診斷一直是臨床檢查中的一項難題,由于其獨特的細胞結構,并且早期感染無明顯癥狀,導致其在檢驗診斷中有一定困難,而由真菌感染所導致的疾病死亡率也逐漸上升,如何對病原真菌進行快速檢測對病原真菌感染的治療有著重要意義。
目前真菌的檢測方法有:涂片鏡檢、真菌培養、分子生物學、特異性標志物和抗體檢測,而培養法是真菌鑒定分類的金標準,但其培養周期長、診斷滯后,對實驗室人員有特殊要求。
近期,江西省胸科醫院病理科引進了新近發展的真菌免疫熒光染色診斷項目。它是一種新型的染色技術,其染色液中的熒光增白劑是一種熒光染料,與多種植物以及真菌細胞壁的幾丁質和纖維素均具有較強的親和力,在特定的紫外光下(350~400 nm)能夠發出亮藍色熒光,通過熒光顯微鏡觀察其形態可達到檢測真菌的目的。
真菌熒光染色診斷的優勢在于,真菌結構在熒光顯微鏡下發出特殊的熒光而易于尋找、辨認,縮短了標本鏡檢時間,達到快速診斷的目的。有文獻報道熒光染色可使標本鏡檢時間縮短到30-60秒,10%KOH濕片平均鏡檢時間為3分鐘。
最近病理科接到了一例手術病例,該病例快速診斷就受益于此項目的開展。患者于12月16日行右上肺部分切除術,并行術中快速冰凍檢查,標本送至病理科,經過標本核對--登記--記錄--取材--切片--染色--診斷等常規操作程序,科主任劉翼軍鏡下觀察診斷考慮肉芽腫性炎,部分組織細胞內可見少量孢子體,考慮真菌感染。為明確診斷,劉主任立即下達醫囑,加做免疫熒光真菌染色,因冰凍診斷具時限性(30分鐘內需出具報告),技術組組長農雪萍迅速進行組織切片及免疫真菌熒光染色,在2分鐘內制作出組織免疫熒光片。劉主任在熒光顯微鏡下即刻診斷,真菌孢子體在熒光顯微鏡下栩栩如生,病理最終診斷呼之欲出:真菌感染性肉芽腫性炎,符合新型隱球菌感染,快速、準確地為臨床提供了明確的診斷。
冰凍HE
真菌熒光染色
冰凍報告
病理是一門形態科學。隨著科學技術的不斷發展,病理醫生可以通過多種手段去證實病理形態,這正是病理學科的進步——讓形態指引診斷方向,用證據來明確診斷。北京協和醫院病理科鐘定榮教授說:“這是進步的表現,病理診斷的手段越多,診斷的準確性就會越高。”